
                                SEQUENCE LISTING

<110> BASF SE

<120> Gene Site Saturation Mutagenesis (GSSM)
  Method

<130> BASF.059WO

<150> US 62/608167
<151> 2017-12-20

<160> 116

<170> FastSEQ for Windows Version 4.0

<210> 1
<211> 735
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Nuclease

<400> 1
gatacactgg agagcattga caactgcgcc gtgggctgcc cgaccggcgg ttctagcaat 60
gttagtatcg tccgccatgc gtatactctg aataacaact ccaccaccaa atttgccaac 120
tgggtggcgt atcacattac taaagacaca cctgcgtcag gcaagactcg taattggaaa 180
actgatccag cgttgaatcc tgctgacacc ctggctccgg cggattatac cggcgctaat 240
gccgctctta aagtggatcg tgggcaccag gcgccgcttg cgagcctggc gggtgtttca 300
gactgggaaa gcctgaatta cctctcaaac atcacgccgc agaaaagtga tctgaatcaa 360
ggcgcgtggg cccgtctgga ggatcaggag cgcaaactta tcgatcgtgc agatattagt 420
agtgtgtata ctgtcacggg cccactgtac gaacgtgata tgggcaaact cccgggcacc 480
cagaaagctc acactattcc gtctgcgtac tggaaagtga tctttattaa caactccccg 540
gcggtgaatc attacgctgc gtttttgttt gatcagaaca ccccaaaagg ggcggatttc 600
tgccagtttc gtgttaccgt tgatgaaatt gaaaaacgca caggcttaat tatctgggcg 660
ggcctgccaa atgacgtcca ggcgtccttg aaatccaagc cgggcgtgct gccggaactg 720
atgggttgca aaaac                                                  735

<210> 2
<211> 245
<212> PRT
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Nuclease

<400> 2
Asp Thr Leu Glu Ser Ile Asp Asn Cys Ala Val Gly Cys Pro Thr Gly
 1               5                  10                  15      
Gly Ser Ser Asn Val Ser Ile Val Arg His Ala Tyr Thr Leu Asn Asn
            20                  25                  30          
Asn Ser Thr Thr Lys Phe Ala Asn Trp Val Ala Tyr His Ile Thr Lys
        35                  40                  45              
Asp Thr Pro Ala Ser Gly Lys Thr Arg Asn Trp Lys Thr Asp Pro Ala
    50                  55                  60                  
Leu Asn Pro Ala Asp Thr Leu Ala Pro Ala Asp Tyr Thr Gly Ala Asn
65                  70                  75                  80  
Ala Ala Leu Lys Val Asp Arg Gly His Gln Ala Pro Leu Ala Ser Leu
                85                  90                  95      
Ala Gly Val Ser Asp Trp Glu Ser Leu Asn Tyr Leu Ser Asn Ile Thr
            100                 105                 110         
Pro Gln Lys Ser Asp Leu Asn Gln Gly Ala Trp Ala Arg Leu Glu Asp
        115                 120                 125             
Gln Glu Arg Lys Leu Ile Asp Arg Ala Asp Ile Ser Ser Val Tyr Thr
    130                 135                 140                 
Val Thr Gly Pro Leu Tyr Glu Arg Asp Met Gly Lys Leu Pro Gly Thr
145                 150                 155                 160 
Gln Lys Ala His Thr Ile Pro Ser Ala Tyr Trp Lys Val Ile Phe Ile
                165                 170                 175     
Asn Asn Ser Pro Ala Val Asn His Tyr Ala Ala Phe Leu Phe Asp Gln
            180                 185                 190         
Asn Thr Pro Lys Gly Ala Asp Phe Cys Gln Phe Arg Val Thr Val Asp
        195                 200                 205             
Glu Ile Glu Lys Arg Thr Gly Leu Ile Ile Trp Ala Gly Leu Pro Asn
    210                 215                 220                 
Asp Val Gln Ala Ser Leu Lys Ser Lys Pro Gly Val Leu Pro Glu Leu
225                 230                 235                 240 
Met Gly Cys Lys Asn
                245 


<210> 3
<211> 43
<212> DNA
<213> GCAAGACTCGTAATTGGAAAGCGGATCCAGCGTTGAATCCTGCArtific

<220> 
<223> Primer

<400> 3
gcaagactcg taattggaaa gcggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 4
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 4
gcaagactcg taattggaaa tgcgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 5
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 5
gcaagactcg taattggaaa gatgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 6
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 6
gcaagactcg taattggaaa gaagatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 7
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 7
gcaagactcg taattggaaa tttgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 8
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 8
gcaagactcg taattggaaa ggcgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 9
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 9
gcaagactcg taattggaaa catgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 10
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 10
gcaagactcg taattggaaa attgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 11
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 11
gcaagactcg taattggaaa aaagatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 12
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 12
gcaagactcg taattggaaa ctggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 13
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 13
gcaagactcg taattggaaa atggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 14
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 14
gcaagactcg taattggaaa aacgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 15
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 15
gcaagactcg taattggaaa ccggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 16
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 16
gcaagactcg taattggaaa caggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 17
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 17
gcaagactcg taattggaaa cgtgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 18
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 18
gcaagactcg taattggaaa agcgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 19
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 19
gcaagactcg taattggaaa gtggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 20
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 20
gcaagactcg taattggaaa tgggatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 21
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 21
gcaagactcg taattggaaa tatgatccag cgttgaatcc tgc                   43

<210> 22
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 22
tcagcaggat tcaacgctgg cgcagttttc caattacgag tct                   43

<210> 23
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 23
tcagcaggat tcaacgctgg gcaagttttc caattacgag tct                   43

<210> 24
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 24
tcagcaggat tcaacgctgg ttcagttttc caattacgag tct                   43

<210> 25
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 25
tcagcaggat tcaacgctgg aaaagttttc caattacgag tct                   43

<210> 26
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 26
tcagcaggat tcaacgctgg gccagttttc caattacgag tct                   43

<210> 27
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 27
tcagcaggat tcaacgctgg atgagttttc caattacgag tct                   43

<210> 28
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 28
tcagcaggat tcaacgctgg aatagttttc caattacgag tct                   43

<210> 29
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 29
tcagcaggat tcaacgctgg tttagttttc caattacgag tct                   43

<210> 30
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 30
tcagcaggat tcaacgctgg cagagttttc caattacgag tct                   43

<210> 31
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 31
tcagcaggat tcaacgctgg catagttttc caattacgag tct                   43

<210> 32
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 32
tcagcaggat tcaacgctgg gttagttttc caattacgag tct                   43

<210> 33
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 33
tcagcaggat tcaacgctgg cggagttttc caattacgag tct                   43

<210> 34
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 34
tcagcaggat tcaacgctgg ctgagttttc caattacgag tct                   43

<210> 35
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 35
tcagcaggat tcaacgctgg acgagttttc caattacgag tct                   43

<210> 36
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 36
tcagcaggat tcaacgctgg gctagttttc caattacgag tct                   43

<210> 37
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 37
tcagcaggat tcaacgctgg ggtagttttc caattacgag tct                   43

<210> 38
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 38
tcagcaggat tcaacgctgg cacagttttc caattacgag tct                   43

<210> 39
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 39
tcagcaggat tcaacgctgg ccaagttttc caattacgag tct                   43

<210> 40
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 40
tcagcaggat tcaacgctgg ataagttttc caattacgag tct                   43

<210> 41
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 41
gcgctaatgc cgctcttaaa gcggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 42
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 42
gcgctaatgc cgctcttaaa tgcgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 43
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 43
gcgctaatgc cgctcttaaa gatgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 44
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 44
gcgctaatgc cgctcttaaa gaagatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 45
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 45
gcgctaatgc cgctcttaaa tttgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 46
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 46
gcgctaatgc cgctcttaaa ggcgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 47
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 47
gcgctaatgc cgctcttaaa catgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 48
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 48
gcgctaatgc cgctcttaaa attgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 49
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 49
gcgctaatgc cgctcttaaa aaagatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 50
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 50
gcgctaatgc cgctcttaaa ctggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 51
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 51
gcgctaatgc cgctcttaaa atggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 52
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 52
gcgctaatgc cgctcttaaa aacgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 53
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 53
gcgctaatgc cgctcttaaa ccggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 54
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 54
gcgctaatgc cgctcttaaa caggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 55
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 55
gcgctaatgc cgctcttaaa cgtgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 56
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 56
gcgctaatgc cgctcttaaa agcgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 57
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 57
gcgctaatgc cgctcttaaa accgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 58
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 58
gcgctaatgc cgctcttaaa tgggatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 59
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 59
gcgctaatgc cgctcttaaa tatgatcgtg ggcaccaggc gcc                   43

<210> 60
<211> 43
<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 60
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<213> Artificial Sequence

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<223> Primer

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<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 62
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 63
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

<400> 64
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<212> DNA
<213> Artificial Sequence

<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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<213> Artificial Sequence

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<223> Primer

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<220> 
<223> Primer

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